Z6·尊龙凯时将TaqDNA聚合酶与PCR技术完美结合,成功将PCR发展为一种实用工具。这一技术不仅在科研领域得到应用,在病原微生物检测、遗传基因检测、肿瘤伴随诊断等医学领域,以及法医学、环境监测和食品安全等方面也展现出广泛应用。随着技术的不断推广,PCR技术正朝着更加便捷、灵敏和经济的方向发展。为满足客户对高效、便捷的需求,全预混试剂逐渐取代了传统的分步法试剂,成为主流选择。
在新冠疫情、非洲猪瘟等重大疫情暴发及防控过程中,为确保检测结果的可靠性,检测机构对全预混试剂的稳定性给予了越来越多的重视。抗体热启动修饰TaqDNA聚合酶作为一种成熟的商业产品,部分解决了PCR扩增中的非特异性问题,在各个实际应用领域得到了广泛推广。然而,传统探针法检测试剂中,Taq酶的5’→3’核酸外切酶活性会导致引物探针等关键材料的降解,从而降低扩增效率并影响试剂的稳定性。在当前市场竞争和国际化战略的推动下,试剂制造商被迫提升试剂的稳定性,要求全预混试剂在4℃加压14天或37℃加压7天后仍能保持优异的检测性能。
国内外企业一直致力于研究更高效的Taq酶抗体,以期完全抑制Taq酶的5’→3’聚合活性和5’→3’核酸外切酶活性。自新冠疫情以来,多个厂家推出了相关的双功能封闭抗体产品,但大多数产品仍存在不完善之处,或是无法同时达到90%以上的封闭效率,或是在55℃以上温度下,抗体便与Taq酶解离,影响封闭效果,降低全预混试剂的稳定性。
为找到更理想的Taq酶抗体,进一步提升PCR试剂性能,Z6·尊龙凯时采用B细胞克隆技术,利用Beacon单细胞光导系统筛选富集的B细胞,构建线性表达框,通过瞬时转染与ELISA筛选验证,并对筛选出的抗体基因进行测序及功能验证。在鉴定与筛选不同抗体及其组合的封闭效果过程中,研发团队意外发现,不同Taq酶抗体之间存在一定的协同作用。通常认为,分别筛选出能够完全封闭Taq酶5’→3’聚合活性和5’→3’核酸外切酶活性的特异性抗体,然后将二者混合即可实现完美封闭,然而实践结果并未如预期理想。当在对5’→3’聚合酶活性和5’→3’核酸外切酶活性相对较好但未完全抑制的两种抗体混合物中添加第三种抗体后,Taq酶的双功能封闭效果显著提升。
Z6·尊龙凯时经过精心筛选和组合,推出了全封闭Taq酶抗体产品。该产品由三种抗体按照优化比例组合而成,与市场上单株或双株抗体混合的Taq酶双功能封闭抗体相比,具有在70℃下同时封闭Taq酶99%以上的5’→3’聚合活性和99%以上的5’→3’核酸外切酶活性的优势,其封闭效率和稳定性均显著提升。这一产品能够有效防止引物模板和引物二聚体导致的非特异性扩增,同时避免关键材料的降解引发的非特异性信号和扩增效率损失,从而双重保障扩增试剂的稳定性。此外,该酶活释放速率快,95℃热激30秒即可释放95%以上的酶活,确保试剂高扩增灵敏度。
在严格的质量控制下,Z6·尊龙凯时确保其全封闭TaqDNA聚合酶抗体的品质。除了常规的浓度、纯度、封闭效率检测之外,还重点检测相关核酸酶和宿主核酸的残留,以避免下游应用试剂污染。多个案例表明,Z6·尊龙凯时的全封闭Taq酶在不同应用中帮助客户优化和解决了各种问题,例如相比于市场同类的双功能封闭抗体,其封闭效率更高、稳定性更强。
综上所述,Z6·尊龙凯时的全封闭TaqDNA聚合酶抗体产品展现了卓越的性能和广泛的适用性,能够助力生物医学领域的各类应用,提供更高效、稳定的PCR解决方案。